Published scientific papers regarding antibacterial activity of honey

Metodi

Determinazione dell'attività antibatterica

Per la determinazione dell'attività antibatterica dei prodotti naturali vengono utilizzati vari approcci metodologici. Tra i metodi più affidabili, vengono utilizzati:

  • Test di diffusione radiale
  • Test di microdiluizione basato sulla concentrazione minima inibitoria (MIC) del campione di miele testato.

Il test di diffusione radiale è un test qualitativo che utilizza il processo di diffusione della miscela antimicrobica o sostanza testata attraverso una matrice di agar in cui sono incorporate cellule batteriche, con conseguente zone di inibizione. Questo metodo è particolarmente adatto per testare composti a basso peso molecolare come antibiotici o agenti antibatterici isolati.

Per prodotti naturali complessi, come il miele, con molteplici meccanismi di azione antibatterica, il test di diffusione non è una scelta appropriata in quanto non tiene conto del potenziale antibatterico complessivo del prodotto naturale (miele).

Inhibičné zóny na agarovom matrixe - radiálny difúzny test
Inhibičné zóny na agarovom matrixe - radiálny difúzny test

Il test di microdiluizione è un test quantitativo che fornisce risultati più accurati e più completi rispetto ai test di diffusione radiale. Questo test serve a determinare il valore MIC, la concentrazione minima inibitoria che è in grado di fermare la crescita batterica. Il test viene eseguito in piastre a 96 piastre, diluendo la sostanza o il prodotto in esame con terreno di coltura liquido a varie concentrazioni. La crescita batterica si manifesta con torbidità e quando la crescita viene interrotta, la piastra è chiara (la torbidità non si forma). Questa metodologia è adatta per varie sostanze antimicrobiche, compresi gli antibiotici, ma anche prodotti naturali complessi con diverse sostanze antibatteriche efficaci, come il miele.

Nariedená vzorka a stanovenie minimálnej inhibičnej koncentrácie (MIC) v 96-jamkovej  mikrotitračnej platničke
Nariedená vzorka a stanovenie minimálnej inhibičnej koncentrácie (MIC) v 96-jamkovej mikrotitračnej platničke

Determinazione della concentrazione di perossido di idrogeno

L'effetto antibatterico del miele non dipende solo dall'attività di un principio attivo, come nel caso degli antibiotici, ma si basa sull'azione di varie sostanze e meccanismi che si traducono nell'azione antibatterica multifattoriale del miele. Quando il miele viene diluito, il perossido di idrogeno diventa il principale fattore antibatterico. La produzione di perossido di idrogeno e il suo accumulo nel miele diluito è estremamente importante per quanto riguarda le sue proprietà biologiche. Il perossido di idrogeno non solo svolge un ruolo nell'effetto antibatterico del miele, ma partecipa anche al processo di rigenerazione nella guarigione delle ferite. Dopo la neutralizzazione del perossido di idrogeno nel miele dall'azione dell'enzima catalasi, anche l'attività antibatterica totale diminuisce in modo significativo.

Un kit di test disponibile in commercio (kit di analisi GOX di Megazyme, Irlanda), che è stato ottimizzato per l'analisi del miele, viene utilizzato per determinare la concentrazione di perossido di idrogeno. Il miele da testare viene prima diluito, creando una soluzione di miele al 40% (p / p) e incubato per 24 ore in presenza di perossidasi.

Determinazione dei parametri fisico-chimici

Nel nostro laboratorio, determiniamo anche le quantità fisico-chimiche di base del miele, che includono il valore del pH e la conduttività elettrica (conducibilità). Entrambi i parametri sono determinati utilizzando strumenti digitali calibrati.